試劑盒說明書
一、試劑盒說明書原理
本試劑盒采用間接競爭 ELISA 方法，在微孔條 上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中的殘留物氯霉素將和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭抗氯霉素抗體，加入 酶標記物后，用 TMB 底物顯色，樣本吸光值與其 所含殘留物氯霉素的含量成負相關(guān)，與標準曲線比 較即可得出相應(yīng)殘留物氯霉素的含量。
二、試劑盒說明書特性
u 孵育溫度： 25℃
u 孵育時間： 30min～30min～15min
蛋類、牛奶（方法一）····························· 0.1 ppb 尿液、血清、腸衣、飼料、奶粉··················· 0.05ppb 組織、肝臟、蜂蜜、牛奶（方法二）············· 0.025ppb
氯霉素· ······································· 100%
甲砜霉素 ······································ < 0.1%
氟甲砜霉素 ······································ < 0.1%
組織、肝臟 ································
85%±20%
蜂蜜、腸衣 ································
83%±25%
牛奶、飼料 ································
75%±23%
尿液、血清 ································
70%±18%
三、試劑盒組成
1
微量測試孔
每條 8 孔，一板 12 條
標準液×6 瓶
0ppb
0.05ppb
2
0.15ppb
0.45ppb
（1ml/瓶）
1.35ppb
4.05ppb
3
酶標記物
12ml
紅色帽
4
抗體濃縮液
1ml
藍色帽
5
底物 A 液
7ml
白色帽
6
底物 B 液
7ml
黑色帽
7
終止液
7ml
黃色帽
8
20X 濃縮洗滌液
40ml
白色帽
9
2X 濃縮復(fù)溶液
50ml
透明帽
四、所用儀器、試劑
具備的儀器：酶標儀、均質(zhì)器、振蕩器、離心機、 刻度移液管、天平（感量 0.01g）、氮 吹儀、恒溫箱
微量移液器：單道 20～200μl、單道 100～1000μl、多道 30～300 μl
試 劑：乙酸乙酯、亞硝基鐵氰化納、葡萄糖苷酸酶(Merck,Art.No.4114)、硫酸鋅、醋酸鈉、正己烷、醋酸
五、樣本前處理步驟
樣本處理前須知
（a）實驗中必須使用一次性吸頭，吸取不同試 劑時要更換吸頭。
（b）實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈， 必要時可對實驗器具進行清潔，以避免污染干擾實 驗結(jié)果。
樣本前處理需配制：
配液 1 C 液（牛奶、奶粉樣本）：
10.7g 亞硝基鐵氰化那鈉加去離子水 100ml 溶解。
配液 2 D 液（牛奶、奶粉樣本）：
28.8g 硫酸鋅加去離子水 100ml 溶解。 配液 3 pH4.8 100mM 醋酸鈉緩沖液（尿樣本）：稱 2.4g 醋酸鈉和 1.2ml 醋酸加去離子水500ml 溶解混合。
配液 4 -水溶液：
配液 5 樣本復(fù)溶液：將 2X 濃縮復(fù)溶液用去離子水按 1：1 稀釋。
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