雞傳染病支氣管炎試劑盒_雞氣管炎抗體檢測試劑盒
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【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：雞傳染性支氣管炎病毒抗體檢測試劑盒（ELISA）
英文名稱：Test Kit for Antibodies to Infectious Bronchitis Virus（ELISA）
【包裝規(guī)格】
48T/盒，96T/盒
【預(yù)期用途】
本試劑用于檢測雞血清中傳染性支氣管炎病毒抗體，可用于雞傳染性支氣管炎病毒抗體疫苗免疫效果評價。
【檢驗方法】
試劑準(zhǔn)備
1、使用前，所有的組分都要至少復(fù)溫2h，確保充分復(fù)溫到室溫。
2、濃縮洗滌液：從冰箱取出的濃縮洗滌液，會有結(jié)晶產(chǎn)生，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水，按1:20稀釋，即1份的濃縮洗滌液，添加19份的蒸餾水。
3、底物：底物液A和B，在使用前，按1:1體積充分混合，混合后10分鐘內(nèi)使用。
操作程序
1、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫，標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品，建議做復(fù)孔。
2、按前面試劑準(zhǔn)備中描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。
3、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
4、設(shè)置陰陽性對照孔、樣本孔，陰陽性對照孔各加對照品100μL，樣本孔加稀釋后樣本100μL。
5、用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
6、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置20s，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)4次（共洗板5次）。若使用自動洗板機(jī)，請按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應(yīng)板。
7、所有孔加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測抗體100μL。
8、用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
8、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置20s，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)4次（共洗板5次）。若使用自動洗板機(jī)，請按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應(yīng)板。
9、將底物A和B按1:1體積充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育10min。
10、每孔加終止液50μl，混勻，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值），無參比波長用空白孔調(diào)零(即所有孔吸光值減去空白孔吸光值)。
【參考值】
實驗正常的情況下，陰性對照≤0.12，陽性對照≥0.58。
【檢驗結(jié)果的解釋】
1.樣品A值≥0.37為陽性；樣品A值在0.2到0.37之間為可疑；樣品A值＜0.2為陰性。
2.本實驗結(jié)果為陰性或可疑時表明豬只抗體水平不足，建議補打相應(yīng)疫苗。
