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產(chǎn)品簡介
石蠟包埋組織DNA提取試劑盒-微量
石蠟包埋組織DNA提取試劑盒-微量
產(chǎn)品價格:
上架日期:2017-11-03 10:17:13
產(chǎn)地:上海
發(fā)貨地:上海
供應(yīng)數(shù)量:不限
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詳細(xì)說明
    石蠟包埋組織DNA提取試劑盒-微量

    產(chǎn)品貨號:EY-TG-42-50/100/200
    包裝:50T/100T/200T
    價格:2958/5756/11352
    產(chǎn)品介紹

    樣本直接提取無需脫蠟,方便用戶。在產(chǎn)品獨(dú)有的緩沖液體系的作用下, DNA從石蠟包被樣本中快速釋放,吸附于高性能的固相基質(zhì),洗脫后即可獲 得高純度   DNA。提取到的核酸純度高于市場上的各種同類試劑盒,可適用于 多種下游應(yīng)用。

    存儲和穩(wěn)定性

    試劑盒(Proteinase K、RNaseA 除外)儲存在環(huán)境溫度-40℃~40℃,相 對濕度不大于 75%,無腐蝕性氣體的避光處。Proteinase K(固體)和 RNaseA(固體)長期保存應(yīng)置于 2~8℃。如兩酶溶解后未能短時間用 完,應(yīng)分別按每次用量分裝成小份后-20℃保存?zhèn)溆?。避免反?fù)凍融造 成酶活力下降。
    -保質(zhì)期:12 個月。

    使用前準(zhǔn)備

    -閱讀說明書,備好必需的試劑和儀器。需自備的試劑、耗材有三氯甲 烷(氯仿)、無水乙醇、純水、PBS(10 mM,pH7.4,福爾馬林固定組 織選用)、1.5 ml 離心管等。全部離心均室溫進(jìn)行。
    -若低溫導(dǎo)致溶液 UL 析出沉淀,可在 50℃左右水浴中重新溶解,搖勻 后使用。
    -首次使用前,向每瓶溶液 W2 中按瓶上標(biāo)簽要求加入指定量的無水乙 醇(自備),搖勻后標(biāo)記備用。每管 Proteinase K 或 RNase A 首次使 用前分別用 275 μl 純水(自備)完全溶解。
    -盒中的 1.5 ml 離心管專用于收集步驟“9”的洗脫液,勿移用。

    提取步驟

    1.樣本處理
    石蠟切片:取石蠟切片(5~10 μm 厚,1×1 cm2 大小)2~4 張于 1.5 ml 離 心管(自備)中。至步驟“2”。 石蠟塊:取刀片刮取或切成薄片的組織樣本 2~4 mg 于 1.5 ml 離心管(自 備)中,至步驟“2”。 注:盡量剔除石蠟(石蠟不會影響消化但是會使消化體積過大。另外盡量 不要使用蠟塊樣品表面長期暴露于空氣中的組織。 福爾馬林等固定液中的樣本:取樣本 2~4 mg,切為數(shù)塊,置于 1.5 ml 離 心管中。用 PBS 緩沖液重復(fù)清洗 3 次后,至步驟“2”。
    PBS 清洗方法(單次):向管中加入 500 μl PBS 緩沖液 (10 mM,pH7.4), 渦旋振蕩混勻后最高轉(zhuǎn)速(12000 g 或 13000 rpm 以上)離心 1 min, 棄去上清。
    2.向樣本中加入溶液 UL 300 μl(樣本應(yīng)完全浸沒于溶液 UL 中,必要時可 短暫離心),80 ℃孵育 60 min(期間每 15 min 取出混勻一次)。
    3.取出離心管后將其冷卻至 56 ℃以下(室溫放置 2~ 3 min 即可),加入
    Proteinase K 5 μl 及 RNaseA   5 μl,渦旋混勻。置 56 ℃孵育 60 min 或直 至組織完全消化。
    4.加入三氯甲烷 300 μl,渦旋 15 sec,最高轉(zhuǎn)速(12000 g 或 13000 rpm 以
    上)離心 5 min。取出離心管,取上層清液至 1.5 ml 離心管(自備)中,
    加入清液 1.1 倍體積的無水乙醇,渦旋混勻。 注意!勿吸入上層清液下的雜質(zhì),雜質(zhì)會影響后續(xù)試驗(yàn)。



    5.將混勻液全部移入套有收集管的微量離心柱中,最高轉(zhuǎn)速(12000 g 或
    13000 rpm 以上)離心 1 min。取出離心柱后棄去收集管中廢液,將離心 柱放回收集管中。
    6.向離心柱中加入 250 μl 溶液 W2,最高轉(zhuǎn)速(12000 g 或 13000 rpm 以上) 離心 30 sec。取出離心柱后棄去收集管中廢液,將離心柱放回。
    7.重復(fù)步驟“6”一次。
    8.最高轉(zhuǎn)速(12000 g 或 13000 rpm 以上)離心 2 min。
    9.將離心柱取出并放入新的 1.5 ml 離心管中。向離心柱中加入 5~ 20 μl 溶液 TE,室溫靜置 2~3 min,最高轉(zhuǎn)速(12000 g 或 13000 rpm 以上)離心 1 min。 DNA 溶液即被收集在 1.5ml 離心管中。
    注:將溶液 TE 預(yù)熱至 50~60℃時使用,可提高洗脫效率。

    【注意事項(xiàng)】
    -按說明書內(nèi)容進(jìn)行操作,違規(guī)操作可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。
    -盒中試劑如不慎濺到皮膚或粘膜時,立即用大量清水沖洗。
    -僅用于科學(xué)研究。


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