雅睿擴(kuò)增儀溫度升不上去維修經(jīng)驗(yàn)豐富manywithshorthalf-lives，becameunbearable.Therefore，pleasegotothe"Manuals/Schematics"sectionsofSam'sNeat，Nifty，andHandyBookmarks.AsofFall，2006。
雅睿擴(kuò)增儀溫度升不上去維修經(jīng)驗(yàn)豐富
一、無放大
1. 再試一次反應(yīng)，你可能漏掉了一些東西。
2. 檢查聚合酶緩沖液是否已完全解凍并充分混合。
3. 檢查引物是否已稀釋至正確的濃度。
4. 配制新的 dNTP 溶液。重復(fù)凍融循環(huán)會(huì)破壞 dNTP。
5. 重新制作模板 DNA，尤其是當(dāng)您使用基因組 DNA 時(shí)。舊庫存可能會(huì)退化或被剪切。
6. 使用不同的聚合酶。如果校對(duì)聚合酶的擴(kuò)增出現(xiàn)問題，我經(jīng)常嘗試使用好的舊 Taq，這通常可以解決問題。不過，請(qǐng)記住對(duì)插入片段進(jìn)行測(cè)序——如果幸運(yùn)的話，不會(huì)出現(xiàn)任何顯著的突變，您可以按原樣使用插入片段。否則，用 Taq 和 1/10 濃度的校對(duì)酶的混合物重新進(jìn)行 PCR，您仍應(yīng)獲得相同的擴(kuò)增結(jié)果，且錯(cuò)誤率較低。
7. 改變退火溫度。如果退火溫度太高，顯然您將無法按照所需的順序獲得任何底漆。另一方面，退火溫度太低會(huì)導(dǎo)致非特異性引發(fā)，不允許出現(xiàn)特異性條帶。找到溫度的方法是使用梯度循環(huán)儀并以 1°C 增量測(cè)試從引物 Tm 到低于 10°C 的范圍。
8. 嘗試使用不同模板濃度的反應(yīng)。您的模板濃度可能太低，或者您的制劑中的雜質(zhì)濃度可能太高。在 50 微升反應(yīng)中嘗試 5-10 個(gè)濃度為 10 至 200 ng 的平行反應(yīng)。
9. 檢查循環(huán)儀——溫度和時(shí)間是否符合您的預(yù)期？
10. 在另一臺(tái)循環(huán)儀中嘗試反應(yīng) - 您正在使用的循環(huán)儀的校準(zhǔn)可能已關(guān)閉。
11.嘗試添加劑。我發(fā)現(xiàn) DMSO 在有問題的擴(kuò)增中特別有用。
12.重新設(shè)計(jì)引物——盡量遵循指南。
有時(shí)，儀器的構(gòu)造，校準(zhǔn)或操作不當(dāng)可能會(huì)導(dǎo)致一些固有的錯(cuò)誤，例如，永磁儀器中的弱彈簧可能會(huì)導(dǎo)致讀數(shù)過高，通過應(yīng)用校正因子，仔細(xì)規(guī)劃測(cè)量程序或重新校準(zhǔn)儀器，可以輕松檢測(cè)或減少這些誤差，有時(shí)，由于操作員的錯(cuò)誤使用。。 激光測(cè)徑儀的測(cè)量將更加可靠和準(zhǔn)確，同時(shí)也減少了不安全的情況，坐標(biāo)測(cè)量機(jī)(激光測(cè)徑儀)校準(zhǔn)工件用于確保激光測(cè)徑儀創(chuàng)建的測(cè)量數(shù)據(jù)通過定期校準(zhǔn)準(zhǔn)確，激光測(cè)徑儀校準(zhǔn)工件還包括ISO-17025認(rèn)可的認(rèn)證，大多數(shù)激光測(cè)徑儀校準(zhǔn)都可以通過使用校準(zhǔn)工件來完成。。
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二、非特異性條帶放大
1、 用陰性對(duì)照（無模板）重新進(jìn)行反應(yīng)。非特異性條帶可能是由于您的一種庫存受到外來 DNA（可能是您的?。┑奈廴?。如果這是一個(gè)問題，請(qǐng)使用新庫存，始終使用高壓滅菌的 PCR 瓶并戴上手套和實(shí)驗(yàn)室外套。
2、提高退火溫度。更好的是，使用梯度PCR 機(jī)（參見 7。）
3、重新設(shè)計(jì)引物并使 3' 更長(zhǎng)。額外的條帶可能來自與您的目標(biāo)相似的序列。增加引物長(zhǎng)度將使它們對(duì)您的目標(biāo)更具特異性。
4、如果非特定產(chǎn)品比您的目標(biāo)短，則增加退火時(shí)間。如果它們比您的目標(biāo)長(zhǎng)，請(qǐng)減少退火時(shí)間。
5、減少DNA模板的使用。
6、嘗試降落 PCR。
在所有故障模式中，我們工作中最可預(yù)防的是污染。污垢，灰塵，碎屑。油和電子設(shè)備根本不會(huì)混合在一起。污染對(duì)精密電路的壽命有兩個(gè)主要影響。隔熱–當(dāng)您在印刷上添加一層碎屑時(shí)，實(shí)際上是在向的基材添加一層隔熱材料。隨著汲取電流，所產(chǎn)生的熱量無法在基板材料的表面上適當(dāng)散發(fā)。這將導(dǎo)致熱流失事件。
如果沒有其他選擇，并不是完全不可能的，由于適度的重載導(dǎo)致指針彎曲，可達(dá)滿量程電流的幾倍，線圈的導(dǎo)線可能不會(huì)損壞，但是該點(diǎn)會(huì)以可能彎曲的力沖入終點(diǎn)擋塊，可能會(huì)非常大，通?？梢孕⌒牡貙⑵鋸澢卦瓉淼男螤睢?。 紅色和紅外色的定位激光測(cè)徑儀組成，可以投射不同形狀的激光:點(diǎn)形，線形和十字形，這些激光傳感器的操作與大多數(shù)不同，也就是說，定位激光測(cè)徑儀傳輸投影，不接收或處理任何進(jìn)一步的反射，激光測(cè)量設(shè)備依靠?jī)?nèi)部產(chǎn)生的激光束的反射來測(cè)量?jī)牲c(diǎn)之間的距離。。 如果在設(shè)計(jì)中未適當(dāng)，則用于掛機(jī)和其他功能的各種微動(dòng)開關(guān)和/或繼電器似乎特別容易退化，如果電話線接聽或模式切換嘈雜或不穩(wěn)定，則可能是原因，盡管可能不容易找到精確的匹配，但仍可能需要?jiǎng)?chuàng)造力，因此大多數(shù)這些小節(jié)和繼電器都可以更換。。
從圖2可以看出，分配給制造工廠進(jìn)行篩選測(cè)試的不夠，因此消費(fèi)者會(huì)收到故障率很高的組件。在消耗工廠或認(rèn)證中心的進(jìn)站檢查期間，執(zhí)行個(gè)步驟。來料檢查期間進(jìn)行的篩選包括EC老化測(cè)試。在這種情況下，預(yù)燒條件由外部影響的成分和水平?jīng)Q定。每種類型的暴露都會(huì)引發(fā)某些故障機(jī)制的發(fā)展。為了減少花費(fèi)。
雅睿擴(kuò)增儀溫度升不上去維修經(jīng)驗(yàn)豐富不要只是把它扔進(jìn)垃圾桶。查看救世軍或善意之類的當(dāng)?shù)卮壬茩C(jī)構(gòu)是否接受損壞的電器。他們可能會(huì)雇用人員進(jìn)行至少簡(jiǎn)單的維修，然后再轉(zhuǎn)售該物品。這不僅會(huì)減少填埋場(chǎng)的混亂狀況，還可以使您的稅收（以及善舉部門）受益。但是，如果您已經(jīng)在處理該項(xiàng)目并將其放棄或減少為一堆爐渣，那么這樣做確實(shí)不合適。 hgfsdfwrcikjws
