| 詳細參數(shù) | |||
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| 品牌 | TY | 型號 | TY-13053 |
| 加工定制 | 否 | ||
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：人唾液皮質(zhì)醇（SC）定量檢測試劑盒（ELISA）
英文名稱：Human salivary cortisol?ELISA KIT
【包裝規(guī)格】
96T/48T
【預(yù)期用途】
僅供科研使用，定量檢測血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清液中唾液皮質(zhì)醇（SC）的濃度。
【檢驗原理】
試劑盒采用酶聯(lián)免疫分析方法。采用生物素標記SC，純化的抗SC抗體包被微孔板，在競爭抑制反應(yīng)中，一定量的固相抗體與生物素標記SC及非標記抗原（校準品或標本）進行抑制競爭反應(yīng)，抗體與生物素標記的SC結(jié)合量受非標記抗原量所抑制，非標記抗原量多,抗體與生物素標記的SC結(jié)合就少，反之結(jié)合就多；反應(yīng)平衡后，形成固相抗體-生物素化SC，再加入酶標記的親和素，形成固相抗體-生物素化SC-酶標-親合素復(fù)合物。經(jīng)加底物顯色后，用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）。隨著SC濃度的升高，OD值逐漸下降呈良好的線性關(guān)系。本試劑盒具有靈敏度高、特異性強、重復(fù)性好、操作簡單、快速等特點，對血清中SC的減少或升高有可靠的檢出性能。
【主要組成成分】
主要成分
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組分 |
數(shù)量 |
主要成分 |
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校準品 |
0.5ml/管*6管 |
抗原配制的6個濃度標準品 |
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包被微孔板 |
96T/48T |
預(yù)包被固相抗體 |
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HRP標記抗體 |
6mL |
HRP標記的檢測抗體 |
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生物素化抗原 |
6mL |
檢測抗原 |
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底物液A |
6mL |
過氧化脲工作液 |
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底物液B |
6mL |
TMB工作液 |
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終止液 |
6mL |
2mol/L稀釋液 |
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20×濃縮洗滌液 |
30mL |
含0.15%Tween20的PBS |
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說明書 |
1份 |
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自封袋 |
1個 |
-- |
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不干膠 |
2片 |
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標準品濃度依次為：48、24、12、6、3、0?nmol/L
本品必須按照具有潛在的感染性進行處理，處理過程應(yīng)當遵循通用的安全措施。
需要但未提供的材料及耗材
1、酶標儀
2、精密移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水
4、洗瓶或者自動洗板機
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、500ml量筒
7、無粉一次性乳膠手套
【儲存條件及有效期】
1、2-8℃保存，切勿冷凍，有效期6個月。
2、開封使用后，包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中，密閉自封袋，并將全部試劑放回2-8℃冰箱。
3、開封后，按照建議的條件保存，校準品、包被微孔板和HRP標記抗體，有效期為14天，其他成分在標簽標明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。
【適用儀器】
半自動的酶標儀，如Thermo MK3，或者國產(chǎn)酶標儀。
【樣本要求】
樣本類型和采集
以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細胞培養(yǎng)上清：4000rpm條件下離心20min，去除細胞顆粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反復(fù)凍融。
2、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，4000rpm條件下離心20min，小心地分離出血清，保存在- 20℃以下，避免反復(fù)凍融。
3、血漿：肝素，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在4000rpm條件下，離心20分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下，避免反復(fù)凍融。
4、組織勻漿：用預(yù)冷的PBS(0.01M，pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1: 9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中，在冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎或反復(fù)凍融。最后將勻漿液5000prm轉(zhuǎn)速離心5-10分鐘，取上清檢測。
樣本保存和穩(wěn)定性
樣本在2-8℃條件下，可以儲存72h，或者在- 20℃儲存6個月。樣本收集后，不是一次檢測完，請按一次用量分裝凍存，避免反復(fù)凍融，使用時在室溫下解凍，確保樣品均勻充分解凍。
【檢驗方法】
試劑準備
1、使用前，所有的組分都要至少復(fù)溫30min，確保充分復(fù)溫到室溫。
2、濃縮洗滌液：從冰箱取出的濃縮洗滌液，會有結(jié)晶產(chǎn)生，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水，按1:20稀釋，即1份的濃縮洗滌液，添加19份的蒸餾水。
