無菌室建設(shè)的使用與管理
無菌室的要求
1．工作室應(yīng)矮小、平整，面積只需4米2左右，高2.2—2.3米，內(nèi)部裝修應(yīng)平整、光滑，無凹凸不平或棱角等，四壁及屋頂應(yīng)用不透水之材質(zhì)，便于擦洗及殺菌。
2．室內(nèi)采光面積大，從室外應(yīng)能看到室內(nèi)情況。
3．為保證無菌室的潔凈，無菌室周圍需設(shè)緩沖走廊，走廊旁再設(shè)緩沖間，其面積可小于無菌室。
4．無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設(shè)有日光燈及供消毒空氣用紫外燈，殺菌紫外燈離工作臺以1米為宜 ，其電源開關(guān)均應(yīng)設(shè)在室外。
5．無菌室與緩沖間進(jìn)出口應(yīng)設(shè)拉門，門與窗平齊，門縫要封緊，兩門應(yīng)錯(cuò)開，以免空氣對流造成污染。
6．無菌室的使用與管理
?。?） 無菌室應(yīng)保持清潔整齊，室內(nèi)僅存放必須的檢驗(yàn)用具如酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環(huán)、玻璃鉛筆等。&不要放與檢測無關(guān)的物品
（2） 室內(nèi)檢驗(yàn)用具及凳桌等保持固定位置，不隨便移動。
（3） 每2—3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺、門、窗、桌、椅及地面，然后用3%石炭酸水溶液噴霧消毒空氣，最后紫外燈殺菌半小時(shí)
（4） 定期檢查室內(nèi)空氣無菌狀況，細(xì)菌數(shù)應(yīng)控制在10個(gè)以下，發(fā)現(xiàn)不符合要求時(shí)，應(yīng)立即徹底消毒滅菌。/無菌室無菌程度的測定方法：取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養(yǎng)基平板各3個(gè)（平板直徑均9厘米），置無菌室各工作位置上，開蓋曝露半小時(shí)，然后倒置進(jìn)行培養(yǎng)，測細(xì)菌總數(shù)應(yīng)置37℃溫箱培養(yǎng)48小時(shí)；測霉菌數(shù)則應(yīng)置27℃溫箱培養(yǎng)5天。細(xì)菌`霉菌總數(shù)均不得超過10個(gè)為 。
?。?） 無菌室殺菌前，應(yīng)將所有物品置于操作之部位（待檢物例外），然后打開紫外燈殺菌30分鐘，時(shí)間一到，關(guān)閉紫外燈待用
（6） 進(jìn)入無菌室前，必須于緩沖間更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋。
?。?） 操作應(yīng)嚴(yán)格按照無菌操作規(guī)定進(jìn)行，操作中少說話，不喧嘩，以保持環(huán)境的無菌狀態(tài)。
器材及場所的滅菌消毒
微生物檢驗(yàn)用器材及場所必須進(jìn)行滅菌或消毒處理，不同的對象采用不同的處理方法
1．高壓蒸汽滅菌: 工作服、口罩、稀釋液等，置高壓殺菌鍋內(nèi)，一般采用121℃滅菌半小時(shí),當(dāng)然不同的培養(yǎng)基有不同的要求,應(yīng)分別處理。
2．火焰滅菌： 接種針、接種環(huán)等可直接火焰滅菌。
3．高溫干燥滅菌： 各種玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃滅菌2小時(shí)。
4．一般消毒: 無菌室內(nèi)的凳、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進(jìn)行滅菌，必須用其他方法進(jìn)行消毒處理，采用2%石炭酸或來蘇兒水溶液擦拭消毒，工作人員的手也用此法進(jìn)行消毒。
5．空氣的消毒： 開啟紫外燈照射30—60分鐘即可。
操作要領(lǐng)
準(zhǔn)備工作
1．先進(jìn)行無菌室空間的消毒，開啟紫外燈30—60分鐘
2．檢驗(yàn)用的有關(guān)器材， 搬入無菌室前必須分別進(jìn)會滅菌消毒
3．操作人員必須將手清洗消毒，穿戴好無菌工作衣、帽和鞋，才能進(jìn)入無菌室
4．進(jìn)入無菌室后再一次消毒手部，然后才進(jìn)行檢驗(yàn)操作
操作過程注意事項(xiàng)
1．動作要輕，不能太快，以免攪動空氣增加污染；玻璃器皿也應(yīng)輕取輕放，以免破損污染環(huán)境
2．操作應(yīng)在近火焰區(qū)進(jìn)行。
3．接種環(huán)、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒，灼燒時(shí)先通過內(nèi)焰，使殘物烘干后再灼燒滅菌
4．使用吸管時(shí)，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必須用洗耳球操作。
5．觀察平板時(shí)不好 開蓋，如欲沾取菌落檢查時(shí)，必需靠近火焰區(qū)操作，平皿蓋也不能 大開，而是上下蓋適當(dāng)開縫。
6．進(jìn)行可疑致病菌涂片染色時(shí)，應(yīng)使用夾子夾持玻片，切勿用手 直接拿玻片，以免造成污染，用過的玻片也應(yīng)置于消毒液中浸泡消毒，然后再洗滌。
7．工作結(jié)束，收拾好工作臺上的樣品及器材，最后用消毒液擦拭工作臺。
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